Фасовка 500 г. Срок годности 4 года. Хранить при температуре 20°С
Среда для транспортировки и сохранения микробиологических проб; рекомендуется для мазков из горла, влагалища и ран, а также для выживания Neisseria gonorrhoeae
Формула в граммах на литр
Активированный уголь 10,0 Хлорид натрия 3,0
Na2HPO4 1,1 Тиогликолят натрия 1,0
Хлорид калия 0,2 KH2PO4 0,2
Хлорид кальция 0,1 Хлорид магния 0,1
Бактериологический агар № 2 7,5
Конечная величина pH 7,3 ± 0,2 при 25°C
Развести 23,2 г среды в 1 литре дистиллированной воды. Тщательно перемешать и нагреть. Часто помешивая, довести до кипения. Кипятить в течение минуты до полного растворения. Разлить в пробирки и стерилизовать 15 минут при 121°C. Поддерживать гомогенное распределение угля по всей среде, переворачивая пробирки по мере их остывания. Готовая среда должна быть черного цвета и храниться при 2–8°C.
Транспортная среда Эймса с древесным углем используется для сбора, транспортировки и сохранения микробиологических образцов. Ее состав рассчитан на поддержание жизнеспособности микроорганизмов без существенного увеличения роста. Среда не является питательной, содержит фосфатный буфер, полужидкая.
Эймс (Amies, 1967) разработал транспортную среду с углем после того, как доказал, что коэффициент выживания N. gonorrhoeae увеличивается при использовании угольных тампонов. Эймс решил проблему удаления угля из тампонов, включив уголь в состав среды. Транспортная среда Эймса рекомендуется для мазков из горла, влагалища и ран.
Древесный уголь, входящий в состав среды, нейтрализует жирные кислоты, токсичные для микроорганизмов. Хлоридные соли поддерживают осмотический баланс, фосфаты выступают в качестве буферной системы; тиогликолят натрия подавляет окислительные процессы и поддерживает восстановительные условия среды.
Поместить инокулированные стерильные тампоны в верхнюю треть транспортной среды в транспортировочном контейнере; отломить выступающую часть стрежня тампона и плотно завинтить крышку. Отправить в лабораторию в течение 24 часов для анализа культуры. До отправки образцы можно хранить в холодильнике.
Следующие результаты были получены при использовании среды на тестовых культурах, хранившихся при различных температурах (4°C и комнатная температура) до 72 часов.
Оценка способности двух систем для транспортировки в жидкой среде к поддержанию жизнеспособности бактерий со сложными питательными потребностями
C. Biggs; The Chester County Hospital, West Chester, PA
КРАТКИЙ ОБЗОР:
ВВЕДЕНИЕ
Транспортная среда Эймса и жидкая среда Стюарта с волокнистыми тампонами десятилетиями использовались в повседневной практике клинической микробиологии. Изменения в методах исследования образцов и проблемы, связанные с организацией рабочего процесса в микробиологии вызвали к жизни спрос на новый тип тампона, с помощью которого можно проводить сразу несколько тестов на одном образце и автоматизировать обработку образцов. Волокнистые тампоны суживают возможности тестирования и исключают его автоматизацию, и на рынке появилось новое поколение тампонов для транспортировки, удовлетворяющих обоим требованиям. Мы рассмотрели две системы для транспортировки, в которых весь образец разводится в жидкой фазе, образуя гомогенную суспензию: транспортная система Copan ESwab, содержащая 1 мл жидкой среды Эймса и укомплектованная патентованным флок-тампоном (Copan Diagnostics, Murrieta, CA), и транспортная система Medical Wire Sigma Swab, содержащая 1 мл жидкой среды Эймса и пенополиуретановый апппликатор (MW&E, Corsham, UK). Мы сравнили способность обеих транспортных систем поддерживать жизнеспособность определённых аэробов и анаэробов при комнатной температуре и при хранении в холодильнике в течение 24 и 48 ч.
МЕТОДЫ
Наша методика тестирования основывалась на методе прокатывания тампоном (стандарт CLSI M40-A). Согласно протоколу CLSI, были сделаны последовательные десятикратные разведения суспензий тестовых микроорганизмов для получения разведения, из которого при посеве на чашку Петри с каждого тампона в начальный момент времени вырастет количество колоний, которое можно подсчитать. Целью было засеять тампоны таким количеством колониеобразующих единиц, изменение которого которое можно визуально и количественно оценить в ходе хранения образца. Проведя в прошлом большое количество исследований транспортных тампонов, мы пришли к выводу, что применять общие правила расчета количества колониеобразующих единиц на основе оптической плотности по МакФарланду к микроорганизмам с разными колониеобразующими характеристиками и размерами клетки, ожидая при этом всегда получать 300 КоЕ на чашку, весьма затруднительно. Часто количество КоЕ получается слишком большим или слишком маленьким. Исходя из этого, мы разработали систему однократных разведений из исходной суспензии МакФарланда, которая позволяет получить число КоЕ, которые легко можно подсчитать невооружённым глазом. Это также сокращает количество рабочих операций, погрешности в разведении, воздействие кислорода и общее время работы с образцами.
Все тестовые штаммы были получены из новых лиофилизированных культур бактерий, взятых из ATCC (American Type Culture Collection – американская коллекция типовых культур), согласно инструкциям, полученным от поставщика. Все культуры посеяны одновременно с использованием подходящей неселективной среды и затем послужили источником для приготовления суспензии оптической плотностью 0,5 МкФ.
ОДНОКРАТНЫЕ РАЗВЕДЕНИЯ
Суспензии для засева тампонов приготовлены из исходной суспензии плотностью 0,5 МкФ посредством следующих разведений:
rykovodstvo.ru > Руководство эксплуатация > Инструкция
Инструкция по применению транспортной среды Эймса. Транспортная полужидкая среда Эймса предназначена для сохранения жизнеспособности широкого круга бактерий, в том числе требовательных, с момента забора материала для посева до начала микробиологического исследования. Среда предупреждает гибель микробных клеток, сохраняет их жизнеспособность, но, в то же время, препятствует размножению микроорганизмов, что исключает или существенно ограничивает преимущественный рост менее требовательных микроорганизмов при ассоциативной микрофлоре субстрата.
Среда Эймса выпускается в двух вариантах: с добавлением угля и без него. Активированный уголь сорбирует метаболиты, угнетающие жизнеспособность высокочувствительных патогенных микроорганизмов (е частности, гонококков). ФОРМА ВЫПУСКА:
В герметично укупоренных флаконах ( по 200 и 400 мл) и в виде транспортных систем (по 5 мл на пробирку). ПОДГОТОВКА СРЕДЫ К ИСПОЛЬЗОВАНИЮ:
С соблюдением правил асептики снять с флакона со средой алюминиевый колпачок и заменить резиновую пробку на стерильную ватномарлевую. На водяной бане разогреть флакон со средой до её полного расплавления (не кипятить!). Извлечь флакон из водяной бани и частично остудить при комнатной температуре в течение 10-15 минут. Стерильно над пламенем горелки разлить транспортную среду в пробирки по 6-10 мл. Объем среды в пробирках определяется техников посева: при посеве мазка, взятого тампоном на тампонодержателе, достаточен небольшой столбик среды (6 мл). При прямом посеве биоматериала (без тампона) объем среды в пробирке увеличивают. ПОСЕВ И ТРАНСПОРТИРОВКА:
Биологический материал погружают в столбик среды таким образом, чтобы он не оставался на ее поверхности. После этого пробирка с засеянной средой направляется в микробиологическую лабораторию в закрытом контейнере. Если транспортировка непосредственно после взятия материала невозможна, пробирки со средой необходимо поместить в рефрижератор (+2 +8 °С) или в прохладное, защищенное от теплового воздействия место. Среда Эймса сохраняет жизнеспособность требовательных аэробных и факультативно анаэробных бактерий около суток, после чего отмечается постепенная гибель клеток. Поэтому пересев с транспортной среды на обогащенные дифференциально-диагностические и другие общепринятые среды целесообразно проводить в минимальные сроки. УСЛОВИЯ И СРОК ХРАНЕНИЯ:
Хранить в прохладном, защищённом от действия солнечных лучей месте.
Транспортные среды широко используются в лабораторной практике. Они дают возможность получить надежные результаты даже в условиях длительного хранения и транспортировки биопроб. Для понимания принципов работы широкоизвестной транспортной среды Эймса (Amies) мы предлагаем Вам ознакомиться с ее физико-химическими характеристиками.
Правильный забор и транспортировка микроорганизмов критично важны для их восстановления и определения в культуре при последующем посеве. Если патогенные микробы погибают на преаналитическом этапе исследований, достоверность анализов падает, что сильно искажает их результаты. Для поддержания жизнеспособности чувствительных микроорганизмов (например, рода Neisseria) после их забора до лаборатории Стюартом была разработана одноименная транспортная питательная среда. После ее модификации Эймсом этот состав стал одним из самых широко используемых сегодня.
Классическая формула Стюарта
Модифицированный состав Эймса
Главное отличие среды Эймса от оригинальной среды Стюарта состоит в том, что глицерофосфат был заменен неорганическим фосфатным буфером. Из-за того, что колиформные организмы и некоторые другие грамотрицательные палочки метаболизируют глицерофосфат в среде Стюарта, их количество в бакпосевах из ран, горла, фекальных образцов увеличивалось, что искажало количественные результаты анализов.
Также Эймсом было показано, что для поддержки жизнеспособности штаммов Neisseria gonorrhoeae концентрация NaCl 0,3 г/л является оптимальной. Ионы Са2+ и Mg2+ были добавлены в состав среды, так как считается, что они регулируют проницаемость клеточной стенки бактерий и таким образом влияют на их выживаемость.
Стюарт обнаружил, что выживаемость Neisseria gonorrhoeae резко увеличивалась при взятии мазков палочками с углем. Проблема была в том, что из-за черной угольной пыли они не пользовались популярностью среди пациентов. Эймс предложил оригинальное решение: добавитьактивированныйуголь непосредственно в транспортную среду.
Применение транспортных систем в работе микробиологической лаборатории
Любое лабораторное исследование состоит из нескольких этапов: преаналитического, аналитического, постаналитического. Если аналитический этап полностью проходит в лаборатории, то два других этапа имеют довольно основательную внелабораторную составляющую. Эта их особенность значительно затрудняет проведение согласованных, последовательных мероприятий по обеспечению качества. Одну из самых рутинных процедур в диагнозе бактериальных инфекций составляет процесс сбора и безопасной для сохранности транспортировки клинических проб от пациента в лабораторию. Эта операция может быть выполнена при помощи транспортных пробирок.
Актуальность бактериологических исследований связана с широким распространением иммунодефицитных состояний среди населения и неукоснительным ростом на этом фоне инфекций, вызванных условно-патогенными микроорганизмами. Постановка диагноза этих инфекций основана на результатах микробиологических исследований больных. Эти же исследования лежат в основе рациональной терапии этих состояний. Микробиологические методы имеют большое значение для выявления инфекционных заболеваний [1]. Лабораторная диагностика инфекционных болезней человека основана на обнаружении в организме пациента микроорганизма, вызвавшего заболевание, микробных антигенов или продуктов их жизнедеятельности (токсинов и др.). Материалом для исследования служат: кровь, гной, моча, мокрота, ликвор, испражнения, рвотные массы, промывные воды и ткани (биопсия, аутопсия). В некоторых случаях проводят исследование объектов окружающей среды: воздух, вода, пищевые продукты, смывы с различных поверхностей. Любой клинический материал должен рассматриваться как потенциально опасный для человека. В обязанности медицинской сестры входит взятие биологического материала у больного, поэтому медицинский персонал должен соблюдать инфекционную безопасность при работе с заразным биоматериалом: при его взятии, хранении, транспортировке, соблюдать правила транспортировки исследуемого материала, грамотно оформлять сопровождающие документы – бланк-направление на исследование. Медицинская сестра должна иметь представление о правилах работы бактериологической лаборатории и основных методах микробиологической лабораторной диагностики [2, 3]. Успехи выделения чистой культуры микроорганизма определяется условиями взятия образца, транспортировки его в лабораторию и последующего хранения до проведения анализа. Если микроорганизм погибает на этапе транспортировки и хранения, достоверность исследования сильно падает [2]. Транспортировку биоматериала в лабораторию следует проводить в максимально короткие сроки, соблюдая температурный режим, чтобы исключить гибель неустойчивых видов микроорганизмов или помещать его в специальные транспортные среды. В процессе транспортировки материал следует оберегать от действия света, тепла, холода, механических повреждений, чтобы исключить гибель микроорганизмов и контаминацию материала посторонней микрофлорой. Лучше материал доставлять в изотермических контейнерах, которые легко очищать и обеззараживать. До настоящего времени во многих бактериологических лабораториях для транспортировки биоматериала использовали самостоятельно приготовленные питательные среды в пробирках с тампоном. В таких условиях биоматериал необходимо доставлять в лабораторию в течение 2-х часов. Неудобством таких сред является то, что они имеют короткий срок годности, должны храниться только в холодильнике, а при транспортировке с биоматериалом в лабораторию пробка может открыться, а среда разлиться. В последние годы в связи с разработкой новых лабораторных технологий, значительно расширились возможности безопасной транспортировки биоматериала для микробиологических исследований, которые гарантируют не только полную безопасность образца и персонала, но и позволяют сохранить жизнеспособность бактерий в исследуемом материале от пациентов длительное время. В Национальном медицинском холдинге г. Астана на базе АО «Республиканский диагностический центр» с 2012 года идет централизация микробиологических лабораторий. Для транспортировки биоматериала из дочерних клиник холдинга применяются транспортные среды (тупферы), которые представляют собой пластиковый шток с хлопковым тампоном и помещены в пробирку с транспортной средой (рисунок 1).
Пробирки с транспортной средой до использования хранятся при комнатной температуре. Так как транспортная среда представляет собой гелеобразное вещество – пробирку с биоматериалом можно транспортировать как в вертикальном, так и в горизонтальном положении. Бактериальные культуры гарантированно сохраняют жизнеспособность до 48 часов при t0 15-220С.
Микроорганизмы в материале пробы защищены от высыхания влагой, содержащейся в транспортировочной среде. Эта среда предназначена для сохранения и поддержания жизнеспособности микроорганизмов во время транспортировки в лабораторию. После отбора проб тампон помещается в пробирку с транспортировочной средой и доставляется в лабораторию, где проводится культивация микроорганизмов на соответствующих питательных средах. Транспортная системы предназначены для сбора и транспортировки только бактериологических проб. Для анаэробных обследований предпочтительнее использовать являются следующие: пробы тканей, полученные во время хирургических процедур, биопсия тканей или кости, жидкость, гной или отсосанные газы, собранные с использованием шприца. Для проб, содержащих вирусы или хламидии, не могут быть использованы данные транспортные системы.
Каждая пробирка снабжена этикеткой, на которой предусмотрено место для внесения сведений о фамилии пациента, дате и времени отбора пробы, номере истории болезни, подписи врача, отобравшего материал, наименовании образца и названии медучреждения. Применение этих изделий, как стандартных закрытых систем, не требует использования дополнительных нестандартных, смонтированных вручную средств предохранения взятого материала от посторонней контаминации, высыхания и т. д. Главным образом, они используются для взятия, сохранения и транспортировки материала в ограниченные сроки (до 5 часов) на небольшие расстояния. Например, транспортировка проб внутри медучреждения, при отборе и транспортировке проб, взятых на вызове у больного, или при экстренной доставке проб из медучреждения в ближайшую контрольную лабораторию. Таким образом, опыт работы с такими транспортными средами свидетельствуют о возможности использования их в клинической микробиологии.
.png "Транспортная среда эймса для чего. Смотреть фото Транспортная среда эймса для чего. Смотреть картинку Транспортная среда эймса для чего. Картинка про Транспортная среда эймса для чего. Фото Транспортная среда эймса для чего")
.png "Транспортная среда эймса для чего. Смотреть фото Транспортная среда эймса для чего. Смотреть картинку Транспортная среда эймса для чего. Картинка про Транспортная среда эймса для чего. Фото Транспортная среда эймса для чего")